酶標(biāo)儀（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種常用的生物化學(xué)分析技術(shù)，用于檢測和定量分析樣品中特定分子的存在和濃度。其工作原理基于酶的催化作用和抗原-抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。

　　酶標(biāo)儀的工作原理如下：

　　1. 固相吸附：首先，在酶標(biāo)板或其他固相載體上，將特定抗原或抗體固定下來。這可以通過物理吸附、共價鍵結(jié)合或特異性親和力來實(shí)現(xiàn)。

　　2. 樣品孵育：待測樣品（如血清、尿液等）與固相載體上的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)，形成特定抗原-抗體復(fù)合物。

　　3. 洗滌：通過洗滌步驟去除非特異性結(jié)合的物質(zhì)，以減少假陽性信號。

　　4. 酶標(biāo)記物添加：添加與待測分子特異性結(jié)合的酶標(biāo)記物（如辣根過氧化物酶，HRP），酶標(biāo)記物可以與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。

　　5. 反應(yīng)底物：添加適當(dāng)?shù)牡孜?，酶?biāo)記物催化底物的反應(yīng)，產(chǎn)生可測量的信號。常用的底物有TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺）或ABTS（2,2'-聯(lián)氨基二乙基-6,6'-二氯苯胺）等。

　　6. 反應(yīng)終止：通過添加適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)終止劑，停止底物的反應(yīng)過程。

　　7. 讀取結(jié)果：使用酶標(biāo)儀測量底物反應(yīng)生成的顏色或熒光強(qiáng)度，與待測物質(zhì)的濃度成正比。

　　酶標(biāo)儀的應(yīng)用包括但不限于以下幾個方面：

　　1. 生物醫(yī)學(xué)研究：酶標(biāo)儀可以用于檢測蛋白質(zhì)、抗體、激素等生物分子，用于疾病機(jī)制的研究、新藥的篩選和藥物代謝的分析等。

　　2. 臨床診斷：酶標(biāo)儀可以用于檢測血清、尿液等樣本中的生物標(biāo)志物，用于疾病的診斷和監(jiān)測，如艾滋病、癌癥、心血管疾病等。

　　3. 食品安全：酶標(biāo)儀可以用于檢測食品中的殘留物、過敏原、致病菌等，保障食品的質(zhì)量和安全。

　　4. 環(huán)境監(jiān)測：酶標(biāo)儀可以用于檢測水體、土壤等環(huán)境樣品中的污染物，如重金屬、有機(jī)物等，有助于評估環(huán)境質(zhì)量和污染程度。

　　總之，酶標(biāo)儀通過酶標(biāo)記物與特定抗原或抗體的結(jié)合反應(yīng)，利用酶的催化作用產(chǎn)生可測量的信號，實(shí)現(xiàn)對特定分子的檢測和定量分析。其應(yīng)用廣泛，涵蓋了生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷、食品安全和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。